??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

貨號(hào)：D5-000  

品名：SureLight® R-Phycoerythrin（R-藻紅蛋白）  

規(guī)格：10mg、50mg、100mg、500mg

品牌：columbia biosciences

類(lèi)型：基因工程優(yōu)化型藻紅蛋白（Phycoerythrin, PE）  

來(lái)源：通過(guò)紅藻（如紫球藻）藻膽蛋白基因重組表達(dá)，經(jīng)純化工藝制備的高純度熒光蛋白。  

應(yīng)用領(lǐng)域：流式細(xì)胞術(shù)（FCM）、熒光免疫分析（如ELISA、免疫組化）、單細(xì)胞測(cè)序標(biāo)記、多色熒光檢測(cè)等。  

??詳細(xì)介紹：從紅藻到實(shí)驗(yàn)室的“顯色明星"  

SureLight® R-Phycoerythrin（R-藻紅蛋白） （D5-000）是一種經(jīng)典的熒光標(biāo)記物，其核心功能是通過(guò)吸收特定波長(zhǎng)光能并發(fā)射更長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光，實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣本（如細(xì)胞、組織）的可視化檢測(cè)。  

它的“出身"自帶優(yōu)勢(shì)——以紅藻中的天然藻紅蛋白為模板，通過(guò)基因工程技術(shù)優(yōu)化了蛋白折疊效率和色素分子（藻膽素）結(jié)合能力，最終得到的R-PE純度≥95%（HPLC檢測(cè)），熒光量子產(chǎn)率較傳統(tǒng)提取的PE提升約30%（數(shù)據(jù)來(lái)源：Columbia Biosciences內(nèi)部測(cè)試）。  

從光譜特性看，D5-000的優(yōu)良激發(fā)波長(zhǎng)為480-490nm（適配主流488nm氬離子激光器），發(fā)射波長(zhǎng)為565-575nm（覆蓋PE-Texas Red雙色檢測(cè)窗口），這使得它在流式細(xì)胞術(shù)中既能單獨(dú)標(biāo)記目標(biāo)分子，也能與FITC（綠光）、PerCP（橙光）等染料組成多色panel，輕松區(qū)分復(fù)雜樣本中的不同細(xì)胞亞群。  

??核心優(yōu)勢(shì)：為什么科研人更愛(ài)D5-000？  

1. 高亮度，低背景：優(yōu)化的藻膽素-蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)減少了非特異性熒光淬滅，相同濃度下熒光強(qiáng)度比市售普通PE高25%-40%（第三方實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證數(shù)據(jù)），尤其在低豐度蛋白標(biāo)記時(shí)優(yōu)勢(shì)顯著。  

2. 穩(wěn)定性強(qiáng)：凍干粉形態(tài)在-20℃避光條件下可保存24個(gè)月（開(kāi)封后建議6個(gè)月內(nèi)用完），溶液狀態(tài)（PBS緩沖液，pH7.4）4℃避光可穩(wěn)定保存3個(gè)月，避免傳統(tǒng)PE易氧化失活的問(wèn)題。  

3. 低內(nèi)毒素，生物相容性高：生產(chǎn)全程采用無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基，內(nèi)毒素含量＜0.1EU/μg（LAL檢測(cè)），適用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)或臨床級(jí)檢測(cè)試劑開(kāi)發(fā)。  

4. 兼容性強(qiáng)：與主流流式細(xì)胞儀（如BD FACSCanto、Beckman CytoFLEX）、熒光顯微鏡（如Leica SP8）及酶標(biāo)儀（如Tecan Infinite）均匹配，無(wú)需額外調(diào)整儀器參數(shù)。  

?購(gòu)買(mǎi)疑問(wèn)&專(zhuān)業(yè)解答  

Q1：D5-000是凍干粉還是液體？如何溶解？  

A：提供凍干粉和預(yù)溶溶液兩種規(guī)格。凍干粉建議用無(wú)菌PBS（pH7.4）或廠商推薦的緩沖液溶解，輕柔渦旋至溶解，避免劇烈震蕩導(dǎo)致蛋白變性。  

Q2：流式細(xì)胞術(shù)中使用D5-000，需要調(diào)整激光器功率嗎？  

A：無(wú)需額外調(diào)整。其優(yōu)良激發(fā)波長(zhǎng)為488nm，主流流式細(xì)胞儀的488nm氬離子激光器或固態(tài)激光器均可高效激發(fā)，建議激光功率設(shè)置為100-200mW（具體以?xún)x器說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)）。  

Q3：多色實(shí)驗(yàn)中，D5-000適合和哪些染料搭配？  

A：推薦與FITC（激發(fā)488nm/發(fā)射525nm）、PerCP-Cy5.5（激發(fā)488nm/發(fā)射670nm）、APC（激發(fā)633nm/發(fā)射660nm）等染料組合，避免與發(fā)射光譜重疊的染料（如Cy5）共用，防止串色。  

Q4：儲(chǔ)存時(shí)需要注意什么？  

A：凍干粉需-20℃避光密封保存（可用鋁箔包裹離心管）；溶解后的溶液建議分裝為小份，4℃避光保存，避免反復(fù)凍融。  

Q5：是否提供批次間一致性驗(yàn)證報(bào)告？  

A：是的！每批次產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)HPLC純度檢測(cè)、熒光量子產(chǎn)率測(cè)定及功能驗(yàn)證（如流式細(xì)胞術(shù)標(biāo)記效率測(cè)試），報(bào)告可在下載或聯(lián)系客服獲取。  

Q6：能否用于體內(nèi)成像？  

A：D5-000內(nèi)毒素極低（＜0.1EU/μg），理論上可用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，但建議先通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其組織分布和代謝特性（不同物種可能存在差異）。  

Q7：如果標(biāo)記抗體時(shí)出現(xiàn)沉淀，怎么辦？  

A：可能是抗體濃度過(guò)高或緩沖液pH不適（建議pH6.5-7.5）。可嘗試降低抗體濃度（1-5μg抗體/10μg R-PE），或更換為含0.1% BSA的PBS緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)。  

Q8：D5-000的摩爾消光系數(shù)是多少？  

A：約1.9×10? M?1cm?1（488nm激發(fā)），具體數(shù)值以產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。  

Q9：是否支持定制化修飾（如偶聯(lián)其他分子）？  

A：目前主要提供標(biāo)準(zhǔn)型R-PE，定制化服務(wù)需聯(lián)系商務(wù)團(tuán)隊(duì)評(píng)估可行性（如修飾位點(diǎn)是否影響熒光特性）。  

Q10：新手第一次使用，需要注意哪些操作細(xì)節(jié)？  

A：建議先做小劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)：取1μg R-PE與1μg抗體混合，4℃避光孵育15分鐘，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)陽(yáng)性/陰性對(duì)照，確認(rèn)熒光信號(hào)強(qiáng)度和背景水平后再批量使用。  

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