巨噬細(xì)胞去除實驗

  去除巨噬細(xì)胞是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。巨噬細(xì)胞可吞噬 clodronate Liposome， 在溶酶體的作用下，clodronate 可釋放出來，當(dāng)其達到一定濃度時，可引起巨噬細(xì)胞的凋亡， 從而去除巨噬細(xì)胞。clodronate Liposome 可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細(xì)胞，如肺、 膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等；也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細(xì)胞，如肝臟 和脾臟中的巨噬細(xì)胞。
1. 脂質(zhì)體的準(zhǔn)備 可以自己制備或者購買商品話的脂質(zhì)體 荷蘭clodronaiposomes和美國Formumax Scientific公司都可以提供現(xiàn)成的商品化的高質(zhì)量clodronate Liposome 具體信息如下
 
 
貨號 品名 包裝 價格 品牌   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含對照 去除率85% 2ml 2985 FormuMax   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含對照 去除率85% 10ml 10485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 對照 2ml 1485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 對照 10ml 5235 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含對照 去除率85% 2ml 3585 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含對照 去除率85% 10ml 12585 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含對照 去除率95% 2ml 4485 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含對照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含對照 去除率95% 2ml 5235 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含對照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
Clodronate  Clodronate Liposomes and PBS Liposomes per 10ml 10ml 4500 clodronaiposomes 

2. 脂質(zhì)體的體內(nèi)注射 隔日尾靜脈注射 200ul clodronate liposome，根據(jù)實驗要求制定注射日程。通過免疫組化 或流式檢測巨噬細(xì)胞的去除效率。
尾靜脈注射方法： 尾靜脈注射方法：
 1. 將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi)，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3 條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈；
2. 將紗布浸泡于約 70 度的溫水中，拿出后包裹尾巴，以達到使尾部血管擴張及軟化表皮 角質(zhì)的目的；
3. 行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約 2cm 一段，使皮膚緊張， 靜脈更為充盈，右手持 1ml 針頭注射器，使針頭與靜脈平行(小于 30°角)，從尾巴的下 1/4 處進針，開始注入藥物時應(yīng)緩慢，仔細(xì)觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明 已刺入血管，可正式注入藥物。
4. 有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始，按次序向尾根部 移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓 1-2min，止血。

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