產(chǎn)品名稱: 74104 Rneasy Mini Kit (50)

生產(chǎn)商: Qiagen GmbH, Germany

儲存與運輸: 常溫運輸，避免高溫和陽光直射。

有效期: 見包裝標(biāo)簽。

產(chǎn)品簡介:

Rneasy Mini Kit 是 Qiagen 公司推出的一款用于從各種生物樣本中快速、高效提取高質(zhì)量總 RNA 的試劑盒。該試劑盒適用于從動物組織、植物組織、細(xì)胞、細(xì)菌等多種樣本中提取 RNA，適用于下游應(yīng)用如 RT-PCR、qPCR、Northern blotting、cDNA 合成等。

qiagen74104產(chǎn)品組成:

1、RNeasy Mini Spin Columns (50 個)

2、Collection Tubes (2 ml, 50 個)

3、Buffer RLT (裂解緩沖液, 50 ml)

4、Buffer RW1 (洗滌緩沖液, 30 ml)

5、Buffer RPE (洗滌緩沖液, 30 ml)

6、RNase-free Water (無 RNase 水, 10 ml)

7、說明書

儲存條件:

*所有組分應(yīng)儲存在室溫（15-25°C）下，避免陽光直射。

*Buffer RLT 在使用前應(yīng)加入 β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol），加入后可在室溫下儲存 1 個月。

qiagen Rneasy Mini Kit操作步驟:

1、樣本裂解:

*對于動物組織: 取 30 mg 組織，加入 600 µl Buffer RLT，使用勻漿器勻漿。

*對于細(xì)胞: 取 1x10^6 細(xì)胞，加入 600 µl Buffer RLT，充分混勻。

*對于植物組織: 取 100 mg 組織，加入 600 µl Buffer RLT，使用勻漿器勻漿。

2、離心:

將裂解后的樣本在 4°C 下以 10,000 x g 離心 3 分鐘，取上清液。

3、RNA 結(jié)合:

將上清液轉(zhuǎn)移到 RNeasy Mini Spin Column 中，以 10,000 x g 離心 30 秒，棄去濾液。

4、洗滌:

*加入 700 µl Buffer RW1 到柱中，以 10,000 x g 離心 30 秒，棄去濾液。

*加入 500 µl Buffer RPE 到柱中，以 10,000 x g 離心 30 秒，棄去濾液。

*重復(fù)加入 500 µl Buffer RPE，以 10,000 x g 離心 2 分鐘，棄去濾液。

5、洗脫:

將 RNeasy Mini Spin Column 轉(zhuǎn)移到新的 1.5 ml 收集管中，加入 30-50 µl RNase-free Water，以 10,000 x g 離心 1 分鐘，收集 RNA。

注意事項:

1、操作過程中應(yīng)避免 RNase 污染，使用無 RNase 的耗材和試劑。

2、Buffer RLT 含有胍鹽，具有刺激性，操作時應(yīng)佩戴手套和護(hù)目鏡。

3、提取的 RNA 應(yīng)盡快用于下游實驗或儲存于 -80°C。

應(yīng)用范圍:

1、RT-PCR

2、qPCR

3、Northern blotting

4、cDNA 合成

如有任何疑問，歡迎聯(lián)系上海起發(fā)！

注：此中文說明書僅作參考，最終請以說明書為準(zhǔn)。

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