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alstemBio ViralBoost Reagent:高滴度病毒生產(chǎn)的強(qiáng)大助力

更新時間:2025-02-24      點(diǎn)擊次數(shù):1417

在基因治療、細(xì)胞治療以及基礎(chǔ)生物學(xué)研究領(lǐng)域,病毒載體作為一種重要的基因遞送工具,其轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的高低直接影響著實(shí)驗(yàn)的成敗與治療效果。然而,提高病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)效率并同時確保細(xì)胞的健康與功能,一直是科研人員面臨的重大挑戰(zhàn)。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 應(yīng)運(yùn)而生,憑借其配方與性能,成功攻克這些難點(diǎn),為科研與臨床應(yīng)用帶來新的曙光。作為AlstemBio公司的中國授權(quán)代理,上海起發(fā)強(qiáng)烈推薦其ViralBoost Reagent產(chǎn)品。

alstemBio ViralBoost Reagent:高滴度病毒生產(chǎn)的強(qiáng)大助力

直擊傳統(tǒng)病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)痛點(diǎn)

轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提升難題的有效攻克

傳統(tǒng)的病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,病毒與細(xì)胞表面的結(jié)合效率有限,且部分病毒在進(jìn)入細(xì)胞后可能面臨內(nèi)體逃逸障礙等問題,導(dǎo)致大量病毒無法有效將基因遞送至細(xì)胞核,從而使得轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低下。ViralBoost Reagent 通過特殊的分子機(jī)制,能夠顯著增強(qiáng)病毒載體與細(xì)胞表面受體的結(jié)合能力。它含有特定的功能性分子,這些分子可以與細(xì)胞表面的某些蛋白或糖基化位點(diǎn)相互作用,引導(dǎo)病毒載體更精準(zhǔn)地錨定在細(xì)胞表面,增加病毒與細(xì)胞的接觸機(jī)會。同時,該試劑還能協(xié)助病毒突破內(nèi)體逃逸的障礙,促進(jìn)病毒基因組從內(nèi)體中釋放并進(jìn)入細(xì)胞核,從而大幅提高了病毒載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。多項實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,使用 ViralBoost Reagent 后,慢病毒、腺病毒等常見病毒載體對多種細(xì)胞系的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率可提升數(shù)倍甚至數(shù)十倍,為基因治療和細(xì)胞治療提供了更強(qiáng)大的基因遞送保障。

細(xì)胞毒性與細(xì)胞功能影響難題的精妙解決

在嘗試提高病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的過程中,一些輔助試劑或處理方法往往會對細(xì)胞產(chǎn)生毒性,影響細(xì)胞的正常生長、代謝和功能,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。這對于需要維持細(xì)胞活性和功能完整性的實(shí)驗(yàn)和治療應(yīng)用來說是一個嚴(yán)重的問題。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 采用溫和且生物相容性良好的配方,在顯著提升轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的同時,對細(xì)胞的毒性極小。經(jīng)過嚴(yán)格的細(xì)胞毒性測試,在有效提升轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的濃度范圍內(nèi),細(xì)胞的存活率、增殖能力以及關(guān)鍵生物學(xué)功能均未受到明顯影響。例如,在對干細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)導(dǎo)時,使用 ViralBoost Reagent 不僅能夠高效地將目的基因?qū)敫杉?xì)胞,而且干細(xì)胞依然能夠保持其多能性和分化潛能,為干細(xì)胞治療相關(guān)研究提供了可靠的技術(shù)支持。

產(chǎn)品優(yōu)勢

★ 顯著提高病毒產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物,能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝,從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量,最高可達(dá)10倍。這一特性使其成為高滴度病毒生產(chǎn)的理想選擇。

★ 廣泛的適用性

無論是逆轉(zhuǎn)錄病毒還是慢病毒,ViralBoost Reagent都能有效增強(qiáng)其包裝效率。其廣泛的適用性使其適用于多種病毒系統(tǒng)和細(xì)胞類型,包括HEK 293T細(xì)胞等常用細(xì)胞系。

★ 低成本,高效益

通過顯著提高病毒顆粒的產(chǎn)量,ViralBoost Reagent幫助實(shí)驗(yàn)室在不增加成本的情況下實(shí)現(xiàn)高滴度病毒生產(chǎn)。這不僅節(jié)省了時間和資源,還提高了實(shí)驗(yàn)的整體效率。

★ 簡單易用

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細(xì)胞后6-14小時,只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中,即可繼續(xù)培養(yǎng)。這種簡單的實(shí)驗(yàn)方案使其適合各種規(guī)模的病毒包裝實(shí)驗(yàn)。

★ 穩(wěn)定的性能

每一批次的ViralBoost Reagent都經(jīng)過嚴(yán)格的功能測試,確保其在病毒包裝中的高效性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品在4℃下可穩(wěn)定保存12個月。

訂購信息

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物,專門用于高滴度病毒生產(chǎn)。它通過在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝,顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒顆粒的產(chǎn)量,最高可達(dá)10倍。

品名:ViralBoost Reagent(VB100)

貨號:VB100

規(guī)格:1 ml

濃度:500X

儲存溫度:4°C

穩(wěn)定性:在4°C條件下保存,有效期為12個月。

alstemBio ViralBoost Reagent:高滴度病毒生產(chǎn)的強(qiáng)大助力

相關(guān)產(chǎn)品推薦

•  Lentiviral Packaging Mix(VP100):用于慢病毒包裝。

•  Lentivirus Precipitation Solution(VC100):用于慢病毒濃縮。

•  NanoFect Transfection Reagent(NF100):用于高效基因轉(zhuǎn)染。

使用方法

以下是使用ViralBoost Reagent進(jìn)行病毒包裝的典型流程:

1.第一天:細(xì)胞鋪板

用1x明膠涂布培養(yǎng)皿或平板30分鐘。吸出明膠,每100 mm平板接種約3-4×10?個HEK 293T細(xì)胞。每個平板使用10 ml培養(yǎng)基。

注意:確保細(xì)胞懸液分散均勻,避免細(xì)胞聚集。

2.第二天:轉(zhuǎn)染

準(zhǔn)備兩個試管,分別加入0.5 ml DMEM。

在一個試管中加入病毒載體和包裝混合物的DNA,輕敲試管使其充分混合。

在另一個試管中加入NanoFect轉(zhuǎn)染試劑(貨號NF100),輕敲試管混合。

將NanoFect-DMEM混合物轉(zhuǎn)移到DNA管中,上下吸移2-3次,渦旋5-10秒,充分混合。

在室溫下孵育15分鐘,使NanoFect/DNA復(fù)合物自組裝。

將NanoFect/DNA混合物滴加到平板中,輕輕搖動平板并放回培養(yǎng)箱。

3.第三天:更換培養(yǎng)基并添加ViralBoost

吸出上清液,用10 ml新鮮培養(yǎng)基替換,并加入20 µl ViralBoost Reagent(500X)。

將平板放回細(xì)胞培養(yǎng)箱。

4.第四天:收集病毒

小心收集上清液至50 ml離心管中,置于冰上。

在4°C下,以1000×g離心10分鐘,去除細(xì)胞碎片。

使用0.45 µm過濾器過濾上清液,并將過濾后的上清液轉(zhuǎn)移至無菌容器中。

按照每4體積病毒上清液加入1體積的冷逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒沉淀溶液(貨號VC100或VC200)進(jìn)行濃縮。

5.第五天:濃縮病毒

在4°C下,以1500×g離心30分鐘。

離心后,病毒顆粒可能在容器底部形成米色或白色沉淀。

丟棄上清液,用1500×g離心5分鐘去除殘留液體。

用冷的無菌PBS或DMEM以原始體積的1/10至1/100重懸病毒沉淀,分裝至低溫小瓶中,并在-80°C下保存。

6.注意事項

使用前確保試劑充分溶解并混合均勻。

操作過程中需小心處理病毒材料,避免溢出。使用漂白劑對危險液體進(jìn)行消毒(終濃度為10%,持續(xù)30分鐘)。

僅用于研究目的,不得用于診斷或治療程序。

基因治療中具體應(yīng)用

在基因治療領(lǐng)域,病毒載體的高效生產(chǎn)是實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用和商業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。然而,傳統(tǒng)的病毒載體生產(chǎn)方法往往面臨產(chǎn)量低、成本高、工藝復(fù)雜等問題。alstemBio的ViralBoost Reagent(VB100)通過顯著提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度,為基因治療提供了強(qiáng)大的助41力。

1. 顯著提高病毒載體產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物,能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝,從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量,最高可達(dá)10倍。這對于基因治療中常用的病毒載體(如AAV、LV等)的生產(chǎn)具有重要意義。例如,在HEK 293T細(xì)胞中使用ViralBoost Reagent后,GFP慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率顯著提升,流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示病毒顆粒產(chǎn)量大幅提升。

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2. 優(yōu)化病毒載體生產(chǎn)效率

基因治療中常用的病毒載體(如AAV)在生產(chǎn)過程中常面臨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ER stress)和未折疊蛋白響應(yīng)(UPR)等問題,這些問題會限制病毒載體的產(chǎn)量。ViralBoost Reagent通過調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝,能夠有效緩解這些問題,從而提高病毒載體的生產(chǎn)效率。

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3. 降低生產(chǎn)成本

通過顯著提高病毒載體的產(chǎn)量,ViralBoost Reagent能夠有效降低基因治療藥物的生產(chǎn)成本。這對于基因治療的商業(yè)化和大規(guī)模應(yīng)用至關(guān)重要。例如,傳統(tǒng)的AAV載體生產(chǎn)方法通常只能達(dá)到10?-1011 VG/mL的滴度,而使用ViralBoost Reagent后,滴度可顯著提高。

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4. 廣泛的適用

ViralBoost Reagent適用于多種病毒載體的生產(chǎn),包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺相關(guān)病毒(AAV)。這種廣泛的適用性使其成為基因治療研究和生產(chǎn)的理想選擇,能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)室和應(yīng)用場景的需求。

5. 簡化操作流程

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細(xì)胞后6-14小時,只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中即可。這種簡單的操作流程不僅節(jié)省了時間和人力,還減少了因操作復(fù)雜導(dǎo)致的誤差。

6. 支持基因治療的臨床應(yīng)用

在基因治療的臨床應(yīng)用中,高滴度的病毒載體是實(shí)現(xiàn)有效基因遞送的關(guān)鍵。ViralBoost Reagent通過提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度,能夠更好地滿足臨床試驗(yàn)和商業(yè)化生產(chǎn)的需求。例如,在AAV載體的生產(chǎn)中,使用ViralBoost Reagent后,病毒基因組滴度和包裝效率顯著提高,這對于需要高劑量病毒載體的基因治療項目尤為重要。


ALSTEM Bio 是一家成立于2012年的創(chuàng)新型生物技術(shù)公司,總部位于美國舊金山灣區(qū)。公司專注于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)重編程技術(shù)、干細(xì)胞誘導(dǎo)和基因編輯相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā),并提供定制化服務(wù)。未來ALSTEM Bio 將繼續(xù)致力于開發(fā)創(chuàng)新的干細(xì)胞研究工具和基因編輯技術(shù),推動再生醫(yī)學(xué)和個性化醫(yī)療的發(fā)展


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