上海起發(fā)worthington 膠原酶現(xiàn)貨說明書

Collagenase

粗膠原酶制劑含有兩種不同的膠原酶的幾種亞型，一種巰基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨基肽酶。這種膠原分解和蛋白分解活性的結(jié)合有效地分解細(xì)胞間基質(zhì)，細(xì)胞間基質(zhì)是組織分解的重要部分。復(fù)合物的一種成分是一種水解酶，它優(yōu)先降解天然膠原中的螺旋區(qū)，位于Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly鍵，其中Y最常見的是中性氨基酸。這種裂解產(chǎn)生易于進(jìn)一步消化肽酶的產(chǎn)物。粗膠原酶被半胱氨酸、EDTA或鄰菲咯啉等金屬螯合劑抑制，但不被DFP抑制。α2-巨球蛋白（一種大的血漿糖蛋白）也對(duì)其有抑制作用。酶活性需要Ca2+。每種膠原酶的特定酶譜都與獲得研究細(xì)胞的組織（或細(xì)胞的用途）相關(guān)，因此Worthington建立了幾種類型的粗膠原酶：1型、2型、3型和4型。

•1型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。

•2型含有較高相對(duì)水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

•類型3含有低水平的次級(jí)蛋白酶。

•類型4的胰蛋白酶活性特別低，以限制對(duì)膜蛋白和受體的損害。

•5型含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。

•6型含有高膠原酶活性，酪蛋白酶與膠原酶的比例約為2:1。與I型（col G）相比，設(shè)計(jì)用于II型（colH）膠原酶的富集。

•7型膠原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型膠原酶高4倍。

•純化的膠原酶，代碼：CLSPA，含有低的次級(jí)蛋白水解活性和高膠原酶活性。

新無動(dòng)物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2膠原酶來源于不含動(dòng)物成分的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的培養(yǎng)物，設(shè)計(jì)用于必須防止引入潛在動(dòng)物源病原體的生物加工應(yīng)用。次級(jí)蛋白酶的水平類似于1型和2型膠原酶。

•CLSAFA是最初的AFA等級(jí)，旨在具有與1型和2型膠原酶相似的膠原酶和次級(jí)蛋白酶。

•CLSAFB含有比CLSAFA更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。

•CLSAFC具有特別低的胰蛋白酶活性，類似于4型膠原酶。

•STZ1和STZ2，0.22μ過濾STEMxyme®AOF膠原酶/中性蛋白酶（Dispase®）混合物，用于原代和干細(xì)胞分離。

沃辛頓還提供預(yù)包裝形式的每種0.22µm過濾制劑，用于直接重組和用于細(xì)胞分離和培養(yǎng)程序。酶類型與不同組織的有效性之間的相關(guān)性很好，部分原因是使用參數(shù)的變化。然而，大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是一項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。沃辛頓膠原酶和污染物分析的詳細(xì)描述可在沃辛頓酶手冊(cè)中找到。此外，組織特異性參考和詳細(xì)的分離條件可在沃辛頓組織分離指南中找到。

膠原酶測(cè)定是Mandl的改進(jìn)，其中膠原酶與天然膠原孵育5小時(shí)，并使用Moore和Stein，JBC，176367，（1948）比色茚三酮法測(cè)定膠原分解程度。釋放的氨基酸表示為每毫克膠原酶微摩爾亮氨酸。

用途：粗膠原酶廣泛用于酶促原代細(xì)胞分離和組織分離過程。大多數(shù)研究人員使用粗膠原酶制劑，如1型、2型、3型和4型，或色譜純化的膠原酶（代碼：CLSPA）；后者通常與二級(jí)酶（如彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等）結(jié)合。為了獲得最佳結(jié)果，蛋白水解活性的精確混合物必須適合待分離的組織。不同組織的類型和有效性之間的相關(guān)性很好，可能部分取決于使用參數(shù)和目標(biāo)以及批次間的差異。有關(guān)更多信息，請(qǐng)參閱膠原酶采樣程序信息。沃辛頓還出版了《組織解離指南》，該指南提供了用于這些應(yīng)用的酶的額外信息，以及多種細(xì)胞和組織類型的特定參考。

相關(guān)產(chǎn)品：

膠原蛋白（CL）

脫氧核糖核酸酶I（DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF）

彈性蛋白酶（ESL/ESL/ESFF）

透明質(zhì)酸酶（HSE/HSEP）

中性蛋白酶（Dispase，NPRO）

木瓜蛋白酶（PAP/PAPL/PAP2）蛋白酶K（PROK）

胰蛋白酶（TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK）

胰蛋白酶抑制劑（LBI/OI/SI/SIC）

細(xì)胞分離Optimizi

描述：

STEMxyme®1，膠原酶/中性蛋白酶（Dispase）

來源：溶組織梭菌/多粘菌芽孢桿菌

無動(dòng)物溶組織梭菌膠原酶（代碼：CLSAFB）和無動(dòng)物多粘菌中性蛋白酶的特殊組合，每毫克干重至少含有250 CLS單位和1000酪蛋白酶單位。設(shè)計(jì)用于干細(xì)胞和其他原代細(xì)胞分離和生物處理應(yīng)用，必須防止引入潛在的動(dòng)物源性病原體。

儲(chǔ)存于2-8°C。

貨號(hào)：LS004106

worthington LS004106