zymoresearch 5-FOA說明書

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)

強(qiáng)調(diào)

• 酵母遺傳反選擇劑：通常用于固化酵母菌株的質(zhì)粒，質(zhì)粒改組，等位基因置換和雙重雜交篩選。
• 方便：可作為純粉末或DMSO中的即用型溶液使用。
• 超純：通過薄層色譜法（TLC），熔點(diǎn)和批次比較確定> 98％。

描述

使用5-氟乳清酸（5-FOA）進(jìn)行酵母的反選擇是一種常見的遺傳篩選方法。質(zhì)粒的酵母菌株固化，質(zhì)粒改組，等位基因置換和雙雜交篩選是可以利用5-FOA的方法。否則對酵母無毒，5-FOA在表達(dá)編碼涉及尿嘧啶合成的牛磺酸5-單磷酸脫羧酶的功能性URA3基因的菌株中轉(zhuǎn)化為有毒形式（即5-氟尿嘧啶）。表型上為Ura +的酵母菌株在選擇后變成Ura-和5-FOA（R）（抗性）。使用超純（<98％）5-FOA粉末的客戶經(jīng)常會(huì)提出5-FOA溶解度的問題，因?yàn)樗谒胁蝗堋Ｒ虼耍覀兲峁┝薉MSO和合成的5-FOA一水合物粉末中的100X濃縮（100 mg / ml）5-FOA溶液。

技術(shù)指標(biāo)

產(chǎn)品信息

5- 氟硼酸 (5-FOA)

產(chǎn)品處方：

· 超純粉末 > 98%： F9001-1 (1g) 和 F9001-5 (5g)

· 100X 溶液： F9003 (10 mL)

· 2X SC/5FOA（合成*葡萄糖培養(yǎng)基）： F9002 (250 mL)

亮點(diǎn)

¨ 易于使用的制劑。

¨ 證明具有大活性。

¨ 生物學(xué)試驗(yàn)。

¨ 穩(wěn)定方便的反向選擇選項(xiàng)。

一般信息

專屬性： 釀酒酵母、粟酒裂殖酵母和其他真菌種類含有

URA3 直系同源物。

· 分子式：C5H3FN2O4

· 穩(wěn)定性：自購買之日起 1 年內(nèi)保證質(zhì)量。

內(nèi)容物：

本產(chǎn)品僅供研究使用，只能由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)人員使用。本試劑盒中包含的一些試劑具有刺激性。佩戴防護(hù)手套和護(hù)目鏡。遵循您的研究機(jī)構(gòu)或機(jī)構(gòu)制定的安全指南和規(guī)則。

一般描述

5 FOA 介質(zhì)方案

粉末：

1. 將標(biāo)準(zhǔn)酵母合成培養(yǎng)基制成 400 mL，加入 1g 5-FOA 粉末，過濾除菌。或者，培養(yǎng)基冷卻至約 55 ℃ 后，在高壓滅菌后加入 5-FOA 粉末。

2. 高壓滅菌瓊脂水（20 g/600 mL，帶攪拌棒），冷卻至約 55 ℃。

3. 向瓊脂水中加入溫?zé)岬暮囵B(yǎng)基的 5-FOA，混合并傾倒平板。

100X 溶液：

1. 按照您喜歡的實(shí)驗(yàn)室方法制備標(biāo)準(zhǔn)的含瓊脂的酵母合成培養(yǎng)基。高壓滅菌。加入攪拌棒以便于混合。

2. 冷卻至約 55 ℃。加入任何熱敏組分（氨基酸、糖或其他物質(zhì)）。

3. 每升加入 10 mL 100X 5-FOA 溶液，混合并傾倒平板。

2X SC/5-FOA：合成*葡萄糖培養(yǎng)基

1. 配制 250 mL 瓊脂水（5g 瓊脂/250 mL），高壓滅菌。包括攪拌棒，便于混合

2. 將 2X SC 5-FOA 培養(yǎng)基預(yù)熱至約 55 ℃。

3. 向瓊脂水中加入 2X SC/5-FOA 培養(yǎng)基，混合并傾倒平板。