ubiquigent 64-0052-050說(shuō)明書(shū)

BAP1
去結(jié)合酶：二氫奎基化酶
別名：BRCA1相關(guān)蛋白1，BRCA1相關(guān)蛋白-1（泛素羧基末端水解酶），腦蛋白6，泛素羧基末端水解酶2，BRCA1相關(guān)蛋白1，腦蛋白-13

貨號(hào)：64-0052-050

批號(hào)：30421

規(guī)格：50 µg

儲(chǔ)存：-70?C

解離酶 (DCEs) 是處理泛素或類(lèi)泛素基因產(chǎn)物的蛋白酶，通過(guò)單個(gè)泛素或類(lèi)泛素蛋白 (UBL) 逆轉(zhuǎn)蛋白的修飾，重塑靶蛋白上的多聚泛素（或 poly-UBL）鏈（Reyes-Turcu等人。2009 年）。去泛素化或去泛素化酶 (DUB) 代表了 DCE 的大家族，并調(diào)節(jié)泛素依賴(lài)性信號(hào)通路。DUB 的活性包括前體分子生成游離泛素、底物降解后泛素再循環(huán)以維持細(xì)胞泛素穩(wěn)態(tài)、通過(guò)鏈編輯去除泛素或泛素樣蛋白 (UBL) 修飾以挽救蛋白酶體降解或影響細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件（Komander等人. 2009).

種屬：人來(lái)源：大腸埃希菌數(shù)量：50 μg

濃度：0.18 mg/mL

處方：50 mM Tris/HCl pH 7.5，

0.1 mM EGTA、150 mM NaCl、0.1%ß-巰基乙醇，

270 mM 蔗糖，0.03%Brij-35

分子量：~107 kDa

純度：> 80%（InstantBlue™SDS-PAGE 法）

穩(wěn)定性/儲(chǔ)存：12 months at -70 C 下 12 個(gè)月；

根據(jù)需要分裝

蛋白序列：請(qǐng)參見(jiàn)第 2 頁(yè)

DUB 主要有兩類(lèi)，半胱氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。BRCA1 相關(guān)蛋白 1 (BAP1) 是一種半胱氨酸蛋白酶，屬于泛素 C 末端水解酶 UCH 家族成員。Jensen *描述了人 BAP1 基因的克隆等人。（1998 年）。核 DUB BAP1 是一種腫瘤抑制因子，在越來(lái)越多的不同來(lái)源的癌癥中缺失和突變，從而使 BAP1 成為癌癥中頻繁和廣泛突變的 DUB 編碼基因（Daou等人。2015 年）。BAP1 包含 BRCA1（乳腺癌 1 型）和 BARD1（BRCA1 相關(guān)的 RING 結(jié)構(gòu)域蛋白 1）的結(jié)合結(jié)構(gòu)域，后者形成腫瘤抑制異二聚體復(fù)合物，HCFC1（宿主細(xì)胞因子 1）與組蛋白修飾復(fù)合物相互作用

續(xù)第 2 頁(yè)

純度：

4-12% 梯度 SDS-PAGE

InstantBlue™ 染色泳道 1：MW 標(biāo)記物泳道 2：1µg GST-BAP1

1 2

蛋白質(zhì)鑒別：

通過(guò)質(zhì)譜法確認(rèn)。

去泛素化酶試驗(yàn)：

GST-BAP1 的活性通過(guò)測(cè)定熒光底物泛素-Rhodamine110-甘氨酸裂解產(chǎn)生泛素和 Rhodamine110-甘氨酸的酶催化的熒光增加來(lái)驗(yàn)證。底物孵育

比較存在或不存在 GST-BAP1 時(shí)

證實(shí)了 GST-BAP1 的去泛素化活性。

細(xì)胞分裂過(guò)程中。BAP1 還與 ASXL1（推定的 Polycomb 組蛋白）相互作用，形成 Polycomb 組抑制性去泛素化酶復(fù)合體 (PR-DUB)，該復(fù)合體參與干細(xì)胞多能性和其他發(fā)育過(guò)程（Harbour等人。2010 年）。近，BAP1 已被確定為 Krüppel 樣鋅指轉(zhuǎn)錄因子 5 的 DUB

(KLF5)，一種在某些類(lèi)型乳腺癌中高表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。KLF5 已被確定為一種不穩(wěn)定的蛋白，被 WWP1（NEDD4 樣 E3 連接酶）泛素化，SCFFBW7（一個(gè) SKP1–cullin-1–F-box 復(fù)合物，包含 FBW7 作為 F-box 蛋白）和 Smurf2（SMAD 特異性 E3 連接酶

2）降解。BAP1 促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移體外以及腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移體內(nèi)。本研究結(jié)果提示，BAP1 和 KLF5 是乳腺癌潛在的治療靶點(diǎn)（Qin等人. 2015).

參考文獻(xiàn)：

Daou S,等人。(2015) BAP1/ASXL2 組蛋白 H2A 去泛素化酶復(fù)合物調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖，在癌癥中被破壞。生物化學(xué)雜志 〔 美 〕290:28643-28663.

Harbour JW,等人。(2010) 轉(zhuǎn)移性葡萄膜黑色素瘤中 BAP1 的頻繁突變。科學(xué)330:1410-1413.

Jensen DE,等人。(1998) BAP1：一種新型泛素水解酶，可與 BRCA1 RING 指結(jié)合，增強(qiáng) BRCA1 介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。致癌基因16:1097-1112.

Komander D，等人。(2009) 斷鏈：去泛素化酶的結(jié)構(gòu)和功能。非修訂版 Mol 細(xì)胞生物學(xué)10:550-563.

秦 J，等人。(2015) BAP1 通過(guò)去泛素化 KLF5 促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移。自然通訊6:8471.

Reyes-Turcu FE等人。(2009) 泛素特異性去泛素化酶的調(diào)節(jié)和細(xì)胞作用。生化年度審查78:363-397.

續(xù)第 1 頁(yè)

蛋白序列：MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEH LY ER DE GDKWRNKKFELGLEFPNLPYY IDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKER AEISMLEGAVLDIRYGVSRIAYSKDFETLKVD FLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHP dfmlydaldvlymdpmcldafpklvcfk krieaipqidkylksskyiawqgwqatf GGGDHPPKSDLEVLFQGPLGSM開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上，開(kāi)塞露在開(kāi)塞露上。

標(biāo)簽（粗體文本）：N 端 GST

蛋白酶裂解位點(diǎn)：PreScission™（LEVLFQ GP）BAP1（常規(guī)文本）：開(kāi)始粗體斜體（氨基酸殘基 1-729）登錄號(hào)：AAH01596